過碳酸鈉消毒劑殺滅對數值檢測技術指南：從懸液定量到載體試驗全流程  

一、檢測原理與標準依據  

1.核心概念與計算方法  

殺滅對數值（KL）是衡量消毒效果的量化指標，反映微生物數量減少的對數級程度，計算公式為：  

式中：  

——對照組活菌數（CFU/mL或CFU/載體）  

——消毒處理后試驗組活菌數（CFU/mL或CFU/載體）  

2.關鍵標準要求  

GB/T27950-2011《手消毒劑衛生要求》：  

對大腸桿菌（8099）、金黃色葡萄球jun（ATCC6538）殺滅對數值≥5.0  

GB27952-2011《普通物體表面消毒劑衛生要求》：  

作用10分鐘，殺滅對數值≥3.0  

二、懸液定量殺菌試驗（基礎方法）  

1.試驗材料準備  

（1）菌株與培養基  

標準菌株：大腸桿菌8099、金黃色葡萄球junATCC6538、白色念珠菌ATCC10231  

培養基：營養瓊脂（細菌）、沙氏葡萄糖瓊脂（真菌）  

（2）消毒劑與中和劑  

過碳酸鈉消毒劑：用無菌水稀釋至目標濃度（如0.5%、1.0%、2.0%）  

中和劑：0.1%硫代liu酸鈉+0.5%吐溫80（中和過氧化物類消毒劑）  

2.操作流程  

（1）菌懸液制備  

1.菌株復蘇：從斜面挑取單個菌落，接種至營養肉湯，37℃培養18-24小時  

2.濃度調整：用0.03mol/LPBS稀釋至10?CFU/mL（麥氏比濁法校準）  

（2）殺菌處理  

1.試驗組：取0.5mL菌懸液+4.5mL消毒劑，20℃水浴作用指定時間（1min、5min、10min）  

2.中和終止：立即取0.5mL混合液加入4.5mL中和劑，混勻后靜置10分鐘  

3.活菌計數：取0.1mL中和后液體涂布平板，37℃培養48小時，計數菌落  

（3）對照組設置  

陽性對照：菌懸液+PBS（無消毒劑）  

陰性對照：消毒劑+中和劑（無菌懸液）  

中和劑對照：中和劑+菌懸液（驗證中和效果）  

3.結果計算與判定  

合格判定：KL≥5.0（高風險場景）或KL≥3.0（一般場景）  

示例：對照組N?=5.2×10?CFU/mL，試驗組Nt=3.8×102CFU/mL，KL=lg(5.2×10?/3.8×102)=5.13  

三、載體定量殺菌試驗（模擬實際應用）  

1.載體選擇與制備  

（1）常用載體  

不銹鋼片：1cm×1cm，經脫脂滅菌，適用于硬質表面消毒效果評價  

布片：1cm×1cm純棉布，高壓滅菌，模擬織物表面  

（2）載體染菌  

1.取10μL菌懸液（10?CFU/mL）滴加于載體表面，37℃干燥30分鐘（形成菌膜）  

2.染菌載體活菌數應控制在10?-10?CFU/載體  

2.試驗步驟  

1.消毒處理：將染菌載體完quan浸泡于消毒劑中，設定作用時間  

2.中和洗脫：取出載體放入含5mL中和劑的試管，超聲洗脫（功率300W，時間1分鐘）  

3.取洗脫液0.1mL涂布平板，培養后計數，計算KL值  

3.關鍵影響因素  

載體材質：布片吸附消毒劑導致局部濃度降低，KL值通常較懸液法低0.5-1.0  

有機物干擾：可在菌懸液中加入5%小牛血清，模擬實際污染場景  

四、典型案例分析  

案例1：過碳酸鈉消毒劑對大腸桿菌殺滅效果  

試驗條件：消毒劑濃度1.0%，作用時間5分鐘，懸液法  

結果：N?=8.6×10?CFU/mL，Nt=45CFU/mL，KL=lg(8.6×10?/45)=5.27（符合要求）  

案例2：載體試驗與懸液法結果差異  

方法大腸桿菌KL金黃色葡萄球junKL白色念珠菌KL  

懸液法5.35.14.8  

不銹鋼片4.94.74.5  

布片4.24.03.8  

五、質量控制與注意事項  

1.試驗全程質控  

菌懸液濃度：每次試驗前用平板計數法驗證，確保10?CFU/mL  

中和劑有效性：中和劑對照活菌數應≥陽性對照的90%  

平行樣：每個濃度做3次平行試驗，KL值相對偏差≤10%  

2.常見問題解決  

（1）結果為0的處理  

若Nt=0，按1CFU計算（如Nt=0時，KL=lg(N?/1)）  

（2）菌落蔓延  

加入0.1%TTC溶液（氯化三苯四氮唑），菌落呈紅色，便于計數  

六、中科檢測技術優勢  

1.全場景覆蓋：具備懸液法、載體法、現場試驗等完整檢測能力  

2.快速應急服務：24小時內出具緊急檢測報告，支持消毒產品備案  

3.方法驗證能力：可針對特殊載體（如醫療器械）開發定制化檢測方案  

注：常規樣品檢測周期為3-5個工作日，報告包含試驗條件、菌種類別、作用時間、殺滅對數值等完整信息，可直接用于消毒產品衛生安全評價。